Quali sono gli standard per il trattamento elettroforetico?

Quali sono gli standard per il trattamento elettroforetico?

Il principio di base dell'elettroforesi è che si riferisce al processo di migrazione delle particelle cariche sotto l'azione di un campo elettrico. Molte biomolecole importanti, come amminoacidi, peptidi, proteine, nucleotidi, acidi nucleici, ecc., hanno gruppi ionizzabili che possono trasportare cariche positive o negative ad uno specifico valore di pH. Sotto l'azione di un campo elettrico, queste molecole cariche si sposteranno verso la direzione dell'elettrodo opposta alla polarità della loro carica.

L'abilità elettroforetica è la capacità di separare, determinare o purificare i campioni utilizzando il campo elettrico, che fa sì che le molecole cariche si muovano a velocità diverse a causa delle differenze nelle proprietà cariche delle varie molecole nel campione da separare, nonché delle differenze nella dimensione, nella forma e in altre proprietà delle molecole stesse. Il processo di elettroforesi deve essere eseguito in un mezzo di supporto. L'elettroforesi dell'interfaccia libera condotta da Tiselius et al. nel 1937 non aveva un mezzo di supporto fisso, quindi la dispersione e la convezione erano relativamente forti, influenzando l'effetto di separazione. Quindi presenta l'elettroforesi con un mezzo di supporto fisso, in cui il campione viene sottoposto al processo di elettroforesi in un mezzo fisso, riducendo l'interferenza di dispersione e convezione.

I mezzi di supporto iniziali erano la carta da filtro e la membrana di acetato di cellulosa, che attualmente sono meno comunemente utilizzati nei laboratori. Per molto tempo, le sostanze a piccole molecole come amminoacidi, peptidi, zuccheri, ecc. sono state solitamente separate e analizzate mediante elettroforesi utilizzando carta da filtro o piastre a strato sottile di cellulosa o gel di silice come mezzo. Tuttavia, attualmente, per l'analisi vengono solitamente utilizzate tecniche più attive come l'HPLC. Questi mezzi sono adatti per separare sostanze a piccole molecole, con un funzionamento semplice e conveniente. Tuttavia, l’effetto di separazione delle biomolecole disordinate è relativamente scarso. L'introduzione del gel come mezzo di supporto ha notevolmente promosso lo sviluppo delle capacità di elettroforesi, facendo diventare le competenze di elettroforesi una delle tecniche importanti per l'analisi di macromolecole biologiche come proteine ​​e acidi nucleici.

Il trattamento elettroforetico non è difficile, ma dobbiamo anche sapere che esistono determinati standard per il trattamento elettroforetico, altrimenti non sappiamo se la qualità è qualificata. Quali sono quindi gli standard per questo trattamento elettroforetico?

1. Superficie liscia

Questa è una condizione base, se la superficie non è liscia si perde la qualificazione base;

2. Spessore uniforme

Il trattamento elettroforetico richiede di garantire uno spessore uniforme per evitare la comparsa di differenze di colore;

3. Nessuna crepa evidente sulla superficie